4Б стол диета: Лечебная диета (стол) №4, 4а, 4б, 4в

Примерное меню диетического стола № 4

Рекомендованное гастроэнтерологами меню на день лечебно-профилактического питания №4, при обострении заболеваний желудка и кишечника:

На весь день: сухарики пшеничные 100-150 грамм, сахар 40 грамм.

Первый завтрак: каша из рисовой сечки протертая (150 грамм), мясные паровые котлеты (100 грамм), чай (250 мл), сухарики из дневной нормы.

Второй завтрак: кисель черничный, сухари белые.

Обед: бульон с добавлением яйца (1 стандартная тарелка), мясное пюре из вареного филе курицы (100 грамм), рисовая каша на воде (150 грамм), кисель черничный (250 мл).

Ранний ужин: чай (250 мл), остаток белых сухариков.

Ужин: котлеты из судака или минтая на пару (120 грамм), рисовая каша вязкая (150 грамм), чай с сахаром.

По мере улучшения симптоматики, диетическое питание расширяется. В него включают белый пшеничный хлеб (вчерашний), макароны из твердых сортов пшеницы, овощные пюре, печеные груши или яблоки, ягодные морсы.

Примерная диета стол 4: меню на каждый день

При остром течении заболеваний кишечника и ярко-выраженной симптоматике (в частности, мучительной диареи), допускается использовать диетическое меню неделю. Рекомендованный рацион отличается однообразием и строгим ограничением даже разрешенных продуктов. Приведенное в таблице меню на неделю применяется в стационарах и санаториях. В домашнем использовании допускается более мягкий режим. Например, можно разнообразить питание напитками, мясными и рыбными блюдами из перечня разрешенных продуктов.

Рецепты диетического стола №4

Диетическое питание при болезни желудка и кишечника отличается строгостью, большим количеством ограничений. Без предварительной консультации с врачом трудно разобраться что можно, а что нельзя категорически есть. Для облегчения самостоятельного составления рациона стол 4, диетологи предлагают целый ряд рецептов, существенно упрощающих диету. Ниже представлены самые популярные варианты блюд, с ингредиентами на 1 порцию.

Бульоны и легкие супы

• Вязкий перловый суп: 50 грамм крупы очистить от мусора, залить 650 мл горячего бульона из постного мяса. Варить 1,5 часа до размягчения перловки. Перетереть через сито, добавить 10 грамм масла сливочного.
• Суп-пюре из диетического мяса птицы: 20 грамм риса залить 600 мл горячей воды. Варить до полного растворения риса в бульоне. 100 грамм вареного белого мяса курицы или индейки измельчить в блендере. Паштет добавить в рисовый отвар, посолить, по желанию влить 10 грамм топленого масла сливочного.

Блюда из мяса и птицы

• Фрикадельки: 100 грамм сырой говядины измельчить блендером. 20 грамм рис отварить до готовности и промыть. Затем рис перетереть блендером до однородного пюре, соединить с мясным фаршем, посолить. Массу хорошо перемешать, разделить на небольшие шарики и готовить на пару.
• Куриные клецки: 100 грамм белого куриного мяса (сырого) измельчить блендером, добавить небольшой ломтик белого пшеничного хлеба (или заменить рисом), половину сырого яйца, 2 столовые ложки молока, соль. Массу хорошо вымесить, разделить на маленькие части и выложить в сотейник. Залить клецки холодной кипяченой водой, варить до готовности 30 минут.

Рыбные рецепты

• Биточки из филе судака: 100 грамм филе судака измельчить блендером, добавить 20 грамм белого размоченного хлеба, половину сырого яйца, соль. Массу хорошо перемешать, вылепить небольшие шарики. Варить на паровой бане 20-30 минут.
• Запеканка из минтая: 100 грамм филе минтая измельчить в блендере. Сварить соус: 60 мл молока довести до кипения, всыпать 10 грамм муки, тщательно перемешивать 2-3 минуты. Соус остудить, подмешать в рыбный фарш. Добавить 1 желток, посолить, затем ввести 1 белок, взбитый в крутую пену. Полученную массу выложить в небольшую форму, варить на паровой бане 10-15 минут.

Чередуя различные рецепты, 4 стол становится вкусным и питательным, что в разы облегчает диетическое лечение желудка и кишечника, а заодно прививает полезные привычки здорового питания. 

Насколько полезен был этот пост?

Нажмите на звезду, чтобы оценить его!

Средний рейтинг / 5. Подсчет голосов:

Диета 4: стол номер четыре при заболеваниях кишечника, для похудения, меню на неделю, что можно и что нельзя, список продуктов в таблице, отзывы

Диета 4 – это лечебное питание, которое применяется при различных заболеваниях кишечника, сопровождаемых расстройством стула, метеоризмом и резкими спазмами в области живота. Также лечебная система питания направлена на улучшение самочувствия человека при колите, гастрите, язве желудка или двенадцатиперстной кишки, дизентерии, энтероколите. Система помогает уменьшить воспалительные проявления в органах пищеварительных органов, обеспечить организм пациента всеми необходимыми полезными веществами.

Показания к применению

Диета номер 4 была составлена известным советским доктором Мануилом Певзнером для устранения воспалительного, гнилостного и бродильного процесса при заболеваниях желудочно-кишечной системы острого или хронического характера.

Диета стол номер 4 построена так, чтобы не провоцировать раздражения, воспаления слизистой поверхности пищеварительных органов, успокаивать ткани кишечника, уменьшать болезненные спазмы. В большинстве случаев лечебный режим по Певзнеру назначается при патологиях желудка и кишечника, которые сопровождаются вздутием живота и диареей.

Диета позволяет эффективно восстановить пищеварительные органы без биохимического, температурного или механического травмирования воспаленных слизистых тканей.

Лечебная диета по 4 столу предполагает полный отказ от блюд, которые могут активизировать секреторную функцию желудка, стимулировать функционирование желчного пузыря и желчеотделение.

Основные правила питания

Основным правилом диетического питания является ограничение количества употребляемых жиров до 70 г, углеводов до 250 г на протяжении суток. При этом дневная доза белка не уменьшается и составляет 90 г.

Правила:

1. Суточная калорийность всех употребляемых блюд и продуктов не должна быть больше 2000 калорий.
2. Запрещаются чрезмерно холодные или горячие блюда, которые могут раздражать слизистую.
3. Максимально допустимая температура еды – до 50°С.
4. Рекомендуемый вид термической обработки – готовка паровым методом или отваривание.
5. Под запретом блюда с твердой и густой консистенцией, разрешены только жидкие или слизистые, перетертые через сито продукты.
6. Есть необходимо не меньше 6 раз, маленькими дозами.
7. Употреблять пищу рекомендуется в одно время.

Диета 4 при заболеваниях кишечника разрешает употребление качественного коровьего и растительного масел, а сахарного песка – но не больше 50 г на протяжении дня.

Разновидности диетического питания

Диета 4 по Певзнеру подразделяется на три типа – 4А, 4Б и 4В. Каждая имеет свои показания к назначению, перечень запрещенных и разрешенных блюд и продуктов.

Лечебная диета 4А используется в случае острого течения патологий желудочно-кишечной системы. Ее длительность чаще всего не более 2-6 суток, на протяжении которых необходимо потреблять до 1600 калорий. Отличается однообразным рационом.

Диета 4Б – лечебный режим назначается при почечных и печеночных болезнях, патологиях поджелудочной железы, желчевыводящих путей. Меню допускает употребление разнообразных блюд, до 2900 калорий.

Диета 4В – наиболее эффективна на протяжении первых дней после обострения заболевания кишечника, после хирургического вмешательства. Назначается перед возвращением к нормальному рациону.

Особенности и рекомендации диеты 4Б

Если назначается диета 4б, меню на неделю предполагает строгое ограничение соли – максимум 5–6 г в сутки. Очень важно выпивать не менее 6 стаканов чистой, негазированной воды ежедневно.

Как и при диете 4А следует есть 5–6 раз, маленькими дозами. Разрешаются диетические разновидности мяса, птицы — с них предварительно необходимо снимать кожицу и вынимать все сухожилия. Раз в неделю можно 1–2 молочные сосиски, кусочек докторской или любой другой диетической вареной колбасы.

Блюда разрешается запечь в духовке, но без использования сливочного или растительного масел. В случае если продукт запекается, формочку нельзя смазывать жиром. В супы, борщи и бульоны разрешается добавлять несколько картофелин, вермишели или макарон. Из ягод, фруктов допускается употребление минимального объема бананов, клубники, малины.

Особенности диеты 4В

Данная система рекомендована специалистами во время ремиссии, на переходе от диеты к обычному рациону. Это питание представляет собой полноценный рацион с существенными ограничениями в десертах, сахаре и соли, жареном, жирном, соленом, копченом и маринованном.

Основные советы по питанию:

• употребляемые блюда разрешается запекать без жира, готовить паровым способом или в мультиварке, отварить – перебивать в пюре не требуется;
• солить необходимо по минимуму – не более 5 г;
• важно помнить о питьевом режиме.

При данном рационе разрешается употреблять вареные макароны, сырники и ряженку, пюре из нескольких картофелин, рубленое мясо, борщи, свекольники, но без бульона на мясе, с небольшой ложкой сметаны, рагу с вареным филе. Несколько раз в неделю допускается включать в рацион молочную вареную колбасу, сыр мягких видов.

Разрешенные и запрещенные продукты и блюда

Люди, страдающие заболеваниями пищеварительных органов, задаются вопросом – 4 стол диета, что можно и нельзя. Лечебная система предполагает полный отказ от пищи, которая оказывает повышенную нагрузку на воспаленную оболочку пищеварительных органов и спровоцировать болезненные спазмы.

Диета 4 стол что можно что нельзя – таблица:

Рекомендуемое недельное меню

Соблюдая стол 4 диета – меню на неделю не следует составлять из однотипных блюд. Необходимо чередовать различные варианты, чтобы нормализовать состояние пищеварительной системы. Рекомендуемый диетический стол 4 на 7 дней:

Соблюдая диету 4 при различных заболеваниях пищеварительных органов можно комбинировать разрешенные продукты, чтобы меню не стало пресным и скучным.

Рецепты диетических блюд

Если назначена диета 4 при заболеваниях кишечника, меню на неделю может быть вкусным и разнообразным. Существует много полезных рецептов, которые разрешается включать в систему.

Как готовить меню на неделю:

Бульон с телятиной

• телятина – 120 г;
• вода очищенная – 600-700 мл.

Постную телятину необходимо порезать порционными брусочками, пересыпать в сотейник с крутым кипятком и на среднем огне томить до готовности. Приготовленное мясо следует протереть и обратно всыпать в сотейник. Лавровые листья, различные приправы использовать запрещается. Единственное исключение можно сделать для щепотки соли.

Овощной суп-пюре

• картошка – 2 шт;
• капуста цветная – 300-400 г;
• морковь – 2 шт;
• масло сливочное – 12 г;
• сушеный укроп или петрушка – 1 ст. л.

Овощи необходимо промыть, картошку и морковку очистить, капустный кочан разобрать на кочерыжки. Все ингредиенты сложить в кастрюлю с кипящей водой, оставить до кипения и протомить на слабом огне еще 15-18 минут.

После этого с кастрюли следует слить часть бульона, а овощи с оставшейся жидкостью истолочь при помощи обычной толкушки. Приготовленный суп нужно заправить сливочным маслом и посыпать сушеной зеленью.

Рыбные тефтельки

• филе постной рыбы – 270 г;
• рис – 65 г;
• вода – 65 г;
• сливочное масло – 12 г.

Для тефтелек необходимо отварить вязкий рис, перемешать с вареным филе и дважды перебить блендером или пропустить через мясорубку. В приготовленную массу следует долить воду, всыпать масло и щепотку соли. Слепить тефтельки и приготовить в мультиварке.

Котлеты из куриной грудинки

• грудка курицы – 350 г;
• куриные яйца – 2 шт;
• мука – 55 г;
• луковица – ½ шт.

Рацион стол 4 разрешает заменять куриную грудку другими видами мясных продуктов. Для котлет нужно пропустить грудку с луковицей через мясорубку, всыпать муку с яйцом и немного присолить. Массу хорошо вымесить, оставить на полке холодильника на 60 минут, после сформировать котлетки и отправить на паровую баню.

Паровой омлет

• яйца – 2 шт;
• обезжиренное молоко – 130 мл.

Яичную массу соединить с молоком и хорошо взбить, досыпать щепотку соли. Яично-молочный состав поместить на несколько минут на паровую баню.

Гречнево-творожной пудинг

• гречка – 100 г;
• обезжиренный творог – 270 г;
• сахарный песок – 15-18 г;
• яйцо куриное – 1 шт.

Вареную гречневую кашу нужно перетереть через ситечко, перемешать с творожной массой. Далее яйцо разделить на желток и белок. Первым в пудинг добавляется желток, затем сахар, после них – оставшийся белок. Подготовленную смесь пересыпать в форму и готовить паровой методикой.

Питание по Певзнеру 4 – важный элемент в лечении патологий желудочно-кишечной системы острого или хронического характера. Лечебный режим позволяет уменьшить воспаление слизистых тканей, устранить прочие симптомы, улучшить общее самочувствие человека.

ВАЖНО! Статья информационного характера! Перед применением необходимо проконсультироваться со специалистом.

основные принципы и таблица разрешенных продуктов

Диету стол 4 назначают при заболеваниях желудочно-кишечного тракта, сопровождающихся сильной диареей и вздутием. Главной целью является устранение неприятной симптоматики. Разберемся, какие продукты можно есть, и как их правильно приготовить.

Лечебное питание – обязательное условие для быстрого восстановления пациентов с заболеваниями желудочно-кишечного тракта. В начале ХХ века знаменитый ученый – основоположник советской диетологии Мануил Певзнер разработал систему, состоящую из 15 диет, каждая из которых подходит для определенных недугов.

Кому показан лечебный стол №4

Диета номер 4 назначается при проблемах ЖКТ, характеризующихся острыми болями, повышенным газообразованием, поносом и другими проявлениями дискомфорта. Различают несколько разновидностей 4 стола в зависимости от фазы заболевания:

 — 4а – хронические колиты и заболевания кишечника, сопровождающиеся диареей и повышенным метеоризмом. Состоит преимущественно из белков, употребление углеводов и жиров сводится к минимуму;

— 4б – оказывает благотворное влияние на работу печени и поджелудочной железы при обострениях в стадии затухания. Отличается большим разнообразием в сравнении с предыдущим вариантом;

— 4в – применяется в период выздоровления и является одним из этапов перехода к полноценному рациональному питанию.

Основные принципы диеты 4

Прежде чем переходить к разговору о разрешенных и запрещенных продуктах, необходимо усвоить несколько основных правил:

1. Питание должно быть дробным. Пищу принимают 4-5 раз в день небольшими порциями.

2. Суточная калорийность рациона составляет примерно 2000 ккал. В случае сильной диареи и угрозы истощения эти цифры могут быть увеличены до 3000 ккал.

3. Строго ограничивается употребление овощей и фруктов, богатых клетчаткой, так как они способствуют развитию воспалительных процессов и вызывают брожение в кишечнике.

4. Обязательно соблюдение питьевого режима, чтобы предотвратить обезвоживание на фоне продолжительного расстройства стула (1,5 л в сутки).

5. Во избежание травматизации слизистой желудка необходимо следовать трем принципам щажения: термическому, механическому и химическому. Это означает, что ежедневное меню должно состоять из перетертых или жидких блюд комфортной температуры с полным исключением продуктов, имеющих резкий вкус (острое, кислое, копченое и т.д.). Предпочтительные способы приготовления – на пару, варка и тушение.

6. Из рациона исключают молоко. Каши варят только на воде.

7. Для супов используют овощные или некрепкие мясные бульоны.

8. Предпочтение лучше отдавать мясным блюдам из фарша.

9. Овощи подаются термически обработанными в виде пюре или в составе супов.

Диета 4: таблица разрешенных и запрещенных продуктов

Примерный рацион на день может выглядеть следующим образом:

Завтрак: Овсяная каша на воде с кусочком сливочного масла + сухарик из белого хлеба

Второй завтрак: пюре из запеченного яблока

Обед: Овощной суп-пюре + паровая котлета с гарниром из перетертой гречки

Полдник: Кисель

Ужин: Паровой омлет

Важно! Любая диета должная назначаться лечащим врачом. Стол №4 и его разновидности – не исключение. Перед тем, как выбирать ту или иную систему питания, обязательно посоветуйтесь со специалистом.

Diet 4B — диета

Бег 0,6 км —

Информация о диете

Основное назначение диеты — нейтрализация острого воспалительного процесса, поражающего кишечник. Диета разработана таким образом, чтобы облегчить усвоение питательных веществ. Кушать небольшими порциями 5-6 раз в день. Исключает все горячее и холодное (ниже 15 и выше 45 градусов).Приоритет для хорошо приготовленных и протертых блюд. Исключена вся острая пища (перец, чеснок и т. Д.) — они химически раздражают пищеварительный тракт. Готовить нужно на воде или на пару. Рекомендуем пить достаточно много — до 1,5 л в день. Пищу можно солить (не более 10 г в сутки).

Рекомендуемые товары

Белок должен быть максимально постным (приветствуются нежирные молочные продукты, яичный белок). В рационе есть диетические виды рыбы и мяса (в виде суфле, пюре, паровых тефтелей).Допустимы некрепкие и нежирные мясные и рыбные бульоны, а также первые блюда на их основе.

Рекомендуемые углеводные продукты: пюре из злаков, печенье, крекеры и вчерашний хлеб (кроме ячменя, пшена, ячменной крупы). Можно есть картофель и цветную капусту. Допустимо вводить в рацион морковь вареную, желательно спелые помидоры (последних не более 100 г в день), сладкие фрукты и ягоды. Рекомендуется кушать кисель и мусс, а также домашний кисель.

Можно пить некрепкие напитки (кофе, чай).Полезно вводить в рацион отвары из отрубей и шиповника. Можно побаловать себя соками (их нужно разбавлять водой в пропорции 1: 1). Можно использовать растительное масло и сливочное масло (они добавляются в блюдо).

Запрещенные товары

Диета исключает тяжелую для пищеварительного тракта пищу (сдобы, слоеное тесто, ржаной хлеб). Противопоказаны супы на крепких бульонах, супы с добавлением бобовых и капусты. Необязательно вводить в рацион цельное молоко и супы из него.Исключены холодные супы. Нельзя есть жирную пищу и вяленое мясо. Противопоказаны консервы, колбасы. Не приносит пользы от жареных яиц и яиц вкрутую. Помимо капусты и бобов из рациона исключаются репа и щавель, редис и свекла, редис и лук, шпинат и репа. Не ешьте грибы.

4Б диета на неделю

Дни № 1, 2, 3

Утренний обед: мясной пирог, каша размятая, чай.В этот и все последующие дни в качестве закусок используйте сыр, печеные яблоки, яйца всмятку и сухарики (на ваш выбор). Рекомендуется пить отвар шиповника. Обед: суп с фрикадельками, овощами, картофельным пюре, паровыми тефтелями и легким мармеладом. Ужин: рыба на пару или омлет из яичного белка, манна. На ночь, каждый день пить кисель. В течение дня ешьте не более 200 граммов хлеба.

Дни № 4, 5

Утро: каша густая отварная, творог, чай.Обеденные блюда: суп-пюре легкого приготовления, порция отварной рисовой каши, вареное мясо (120 г) и вишневый кисель. Вечер: паровые рыбные котлеты и рисовый пудинг.

Дни № 6, 7

Утренний обед: каша размятая негустая, язык отварной, чай. На обед приготовьте суп с фрикаделками с яйцом или кашей, съешьте его с пюре, куском отварного мяса (в мясном соусе). Добавьте в рацион ягодный кисель. Ужин: рыбное блюдо и каша-пюре, легкий чизкейк и чай.

Обзоры

Диета заставляет 4В соблюдать определенные ограничения, и они касаются не только продуктов, но и способов их приготовления. Это сложно, но дает хороший результат.

Пропускная способность сельскохозяйственных земель США: Десять сценариев питания Пропускная способность сельскохозяйственных земель США: Десять сценариев питания | Elementa: Наука антропоцена

Из представленных данных можно сделать три урока.Во-первых, требования к пастбищам следует отличать от требований к пахотным землям. Как показано на рис. 2, годовые потребности в сельскохозяйственных землях на душу населения имеют широкий (восьмикратный) диапазон в зависимости от сценариев. Простое сравнение общих требований к земле может привести к ошибочному выводу о том, что различия в несущей способности столь же велики. Однако пастбища по определению не пахотны, и расчетная урожайность кормов для этого ресурса довольно низкая. Таким образом, оценки потребностей в земле на душу населения имеют смысл только в том случае, если они разделены на составляющие пулы.

Во-вторых, состав рациона сильно влияет на общий экологический след. Как показано на рис. 3, пять рационов работают в условиях, в которых общий экологический след сельского хозяйства не меняется, даже несмотря на то, что его продуктивность сильно различается. Тем не менее, 40% здоровых всеядных, 20% здоровых всеядных и три вегетарианских диеты имеют совокупный след меньше, чем территория, используемая в настоящее время в США. Это открытие является важным в свете недавних призывов ограничить влияние сельского хозяйства (Godfray et al. al., 2010; Foley et al., 2011). Обеспечение продуктами питания, хотя и необходимо, не единственная важная экологическая услуга, предоставляемая землей. Некоторые из этих услуг, такие как улавливание углерода, могут быть совместимы с выпасом, по крайней мере, в хорошо управляемых системах. Другие услуги, такие как среда обитания диких животных, могут быть затронуты там, где одомашненные виды конкурируют за биомассу с дикими жвачими и копытными. Наконец, использование многолетних пахотных земель для выпаса скота или производства сена может потенциально конкурировать с производством биоэнергии, где энергия биомассы или тягловые животные являются возможными альтернативами ископаемым видам топлива.

В-третьих, изменения в рационе питания в соответствии с Руководящими принципами питания для американцев 2010 г. подразумевают очень разное распределение земель по типам сельскохозяйственных культур. В частности, земли под зерновыми, фруктами и овощами, бобовыми и орехами необходимо увеличить по сравнению с землями под кормовыми зернами и масличными культурами, сеном и пахотными пастбищами. Исследователи Министерства сельского хозяйства США отметили последствия соблюдения рекомендаций по питанию (Young and Kantor, 1999; Buzby et al., 2006), и эти закономерности еще более поразительны при сценариях сокращения потребления мяса.Короче говоря, сценарии, которые отличаются от базовых, представляют собой все более серьезные отклонения от статус-кво и будут иметь последствия, выходящие далеко за рамки землепользования. Хотя такие соображения выходят за рамки цели настоящего исследования, важно признать, что переход к рациону на основе растений может потребоваться сопровождаться изменениями в агрономических и садоводческих исследованиях, расширении знаний, знаниях операторов фермы, инфраструктуре, управлении животноводством, фермой и продовольствием. политика и международная торговля.

Углеводные источники пищи и рекомендации по потреблению — Питание: наука и повседневное применение

Если посмотреть на группы продуктов, представленные в MyPlate ниже, какие группы продуктов, по вашему мнению, содержат углеводы? Если вы ответили, то все верно! В этом разделе мы рассмотрим, какие группы продуктов содержат различные типы углеводов.Одна из целей этого курса — узнать больше о различных питательных веществах в пищевых продуктах и ​​понять важность употребления в пищу широкого разнообразия продуктов из разных пищевых групп.

Рисунок 4.8. Выберите изображение MyPlate, на котором показаны группы продуктов Министерства сельского хозяйства США: фрукты, овощи, злаки, белки и молочные продукты.

Фрукты — Фрукты сладкие, поэтому мы знаем, что они должны содержать сахар. Фрукты содержат сахарозу, глюкозу и фруктозу. Этот сахар является естественным и содержит другие полезные вещества, такие как витамин С и калий.Целые фрукты также содержат клетчатку, поскольку клетчатка содержится во всех цельных растительных продуктах. В соке практически нет клетчатки, даже в апельсиновом соке с высоким содержанием мякоти.

Овощи — Некоторые овощи сладкие и также содержат сахар, хотя и намного меньше, чем фрукты. Как и фрукты, некоторые овощи (например, морковь и стручковая фасоль) содержат небольшое количество сахарозы, глюкозы и фруктозы. Крахмалистые овощи (например, кукуруза, горох и картофель) в основном содержат крахмал, но некоторые из них также сладкие и содержат сахарозу, глюкозу и фруктозу (например, сладкий картофель и сладкая кукуруза).Как и цельные фрукты, любой цельный овощ также содержит клетчатку.

Зерна — Зерна содержат крахмал и клетчатку. Пророщенные зерна также содержат мальтозу. Если зерна подслащены (добавлен сахар), они могут содержать сахарозу (белый тростниковый сахар) или фруктозу и глюкозу (мед и / или HFCS).

Молочные продукты- Это единственный корм для животных, содержащий углеводы. Молоко, сыр и йогурт содержат натуральную лактозу. Если молочные продукты (например, йогурт) подслащены, они также будут содержать добавленный сахар, такой как сахароза (белый тростниковый сахар) или фруктоза и глюкоза (мед и / или HFCS).

Белок — Мясо не содержит углеводов, но многие растительные продукты, относящиеся к группе белков, такие как бобы и орехи, содержат крахмал и клетчатку.

Жиры — Концентрированные жиры, такие как сливочное масло и масло, не содержат углеводов.

Эта информация обобщена в таблице ниже:

Таблица 4.1. Группы продуктов USDA с примерами продуктов и типом углеводов, присутствующих в каждой группе продуктов.

Глядя на все продукты, содержащие углеводы, вы можете догадаться, почему исключение углеводов из рациона может привести к потере веса. Это резко сокращает количество вариантов выбора, оставляя вас в основном с низкоуглеводными овощами и мясом. Неудивительно, что при таком способе питания люди обычно потребляют меньше калорий. Однако для большинства людей это не является устойчивым или приятным способом питания, и также может быть трудно придерживаться сбалансированной диеты с таким количеством запрещенных продуктов.

Общее потребление углеводов

Рекомендуемая дневная норма потребления углеводов составляет 130 граммов. Это минимальное количество глюкозы, используемое мозгом, поэтому, если вы потребляете меньше этого количества, вы, вероятно, впадете в кетоз. Для удовлетворения высоких энергетических потребностей организма в глюкозе допустимый диапазон распределения макроэлементов (AMDR) для взрослого составляет 45–65% от общего количества калорий.Это примерно от 225 до 325 граммов углеводов в день при диете в 2000 калорий. ( ПОМНИТЕ: 1 грамм углеводов содержит 4 калории. )

Впуск волокна

Адекватное потребление (AI) клетчатки составляет 14 граммов клетчатки на каждые 1000 потребляемых калорий. Это около 28 граммов для взрослой женщины (19-30 лет) и 38 граммов для взрослого мужчины (19-30 лет). Большинство людей в Соединенных Штатах получают только половину необходимого количества клетчатки в день — от 12 до 18 граммов.

Потребление добавленного сахара

Диетические рекомендации 2020 года рекомендуют, чтобы менее 10% от общего количества калорий приходилось на добавленные сахара из-за его связи с ожирением и хроническими заболеваниями. Это означает, что кто-то, соблюдающий диету в 2000 калорий, захочет ограничить потребление добавленного сахара примерно до 12 чайных ложек в день. Для сравнения: банка газировки объемом 12 унций содержит около 10 чайных ложек сахара. Мы обсудим добавленный сахар более подробно позже в этой главе.

Ниже представлена ​​таблица, в которой обобщены приведенные выше рекомендации.

Таблица 4.2 Диетические рекомендации по углеводам

Информация о растительных белках и таблица

Это очень популярный вопрос. И важный вопрос, но даже если вы не придерживаетесь растительной диеты, знаете ли вы, сколько белка вы должны есть ежедневно?

Сколько протеина нам действительно нужно?

Ну, в Соединенных Штатах референсная диета (DRI) для белка составляет от 0,8 до 1,0 грамма белка на килограмм веса тела.Чтобы рассчитать свой вес в килограммах, разделите свой вес в фунтах на 2,2. Это число примерно соответствует тому, сколько граммов вам нужно каждый день. Приблизительно 15-25% ваших калорий должны поступать из источников белка. Хотя белок, безусловно, является важным питательным веществом, которое играет множество ключевых ролей в функционировании нашего организма, нам не нужны его огромные количества.

Многие американцы потребляют вдвое больше необходимого количества белка, и важно отметить, что избыток белка не может храниться в организме — в конечном итоге его выведение приводит к нагрузке на печень и почки.Чрезмерное потребление белка связано с определенными видами рака (например, толстой кишки, груди, простаты, поджелудочной железы), заболеванием почек и даже остеопорозом. Если вы едите разнообразную чистую цельную пищу, вы должны получать весь необходимый белок, не нагружая свое тело.

Нравится эта статья? Поделитесь этим с другими в Твиттере, нажав здесь.

Почему белок так важен?
Как вы, возможно, знаете, белки состоят из аминокислот, и они являются «строительными блоками» жизни.Наша кожа, мышцы, сухожилия, хрящи, даже волосы и ногти — все это благодаря белку. Белок помогает формировать ферменты, гормоны, антитела и новые ткани. Он заменяет старые клетки новыми блестящими и переносит важные питательные вещества в эти клетки и из них. Человеческое тело может производить все, кроме девяти из 22 аминокислот, составляющих белки. Эти девять аминокислот известны как «незаменимые» аминокислоты и поэтому должны быть получены из того, что мы едим. Источники этих «предметов первой необходимости» во многом совпадают, что еще раз доказывает, что разнообразие лучше всего подходит для покрытия баз.Вам не нужно беспокоиться о каждой детали или тратить кучу времени на планирование еды — ешьте целый ряд цельных продуктов, и вы получите то, что вам нужно.

* Аргинин
Классифицируется как полужидкая или «условно» незаменимая аминокислота в зависимости от стадии развития и состояния здоровья человека.
Находит его: миндаль, свекла, бразильские орехи, гречка, морковь, кешью, сельдерей, нут, кокос, огурцы, семена льна, чеснок, зеленые овощи, фундук, фасоль, лук-порей, чечевица, салат, пищевые дрожжи, лук. , пастернак, пекан, кедровые орехи, картофель, тыквенные семечки, редис, кунжут, ростки, семена подсолнечника и грецкие орехи.
. . .
Гистидин
Особенно необходим в младенчестве для правильного роста и развития — когда-то считалось необходимым только для новорожденных, но теперь известно, что он необходим и для взрослых.
Находит его: яблоки, бананы, бобы, свекла, гречка, морковь, дыня, цветная капуста, сельдерей, цитрусовые, огурцы, одуванчик, эндивий, чеснок, зелень, бобовые, грибы, гранаты, редис, рис, водоросли, кунжут. , шпинат, спирулина и зелень репы.
. . .
Изолейцин
Необходим для производства, поддержания и восстановления мышц, особенно после тренировки. Участвует в образовании гемоглобина, регулирует уровень сахара в крови, образование тромбов и энергию.
Находит его: миндаль, авокадо, кешью, нут, кокос, чечевица, оливки, папайя, водоросли и большинство семян, таких как подсолнечник.
. . .
Лейцин
Необходим для выработки гормона роста, производства и восстановления тканей.Предотвращает мышечное истощение и используется при лечении таких состояний, как болезнь Паркинсона.
Находит его: миндаль, спаржа, авокадо, нут, кокос, чечевица, овес, оливки, папайя, рис, семена подсолнечника и грецкие орехи.
. . .
Лизин
Отлично подходит для абсорбции кальция, развития костей, поддержания азота, восстановления тканей, выработки гормонов, выработки антител.
Находит его: амарант, яблоки, абрикосы, фасоль, свекла, морковь, сельдерей, огурец, зелень одуванчика, виноград, папайя, петрушка, груши, горох, шпинат и зелень репы.
. . .
Метионин
«Очиститель» — важен для эмульгирования жира, пищеварения, антиоксиданта (профилактика рака), профилактики артериального налета (здоровье сердца) и удаления тяжелых металлов.
Находится в: черной фасоли, бразильских орехах, кешью, фасоли, овсе, семенах кунжута, спирулине, шпинате, семенах подсолнечника и кресс-салате.
. . .
Фенилаланин
Предшественник тирозина и сигнальные молекулы: дофамин, норадреналин (норадреналин) и адреналин (адреналин), а также пигмент кожи: меланин.Поддерживает обучение и память, мозговые процессы и повышение настроения.
Находится в: яблоках, свекле, моркови, кешью, семенах льна, фундуке, пищевых дрожжах, петрушке, ананасах, семенах тыквы, семенах кунжута, семенах подсолнечника, шпинате и помидорах.
. . .
Треонин
Контролирует белки организма для поддержания или переработки процессов.
Находит его: миндаль, фасоль, морковь, сельдерей, нут, капуста, семена льна, зелень, зеленые листовые овощи, капуста, чечевица, фасоль лима, нори, орехи, папайя, семена кунжута, семена подсолнечника и грецкие орехи.
. . .
Триптофан
Необходим для выработки ниацина, выработки серотонина, снятия боли, регулирования сна и настроения.
Находят: брюссельская капуста, морковь, сельдерей, чеснок, зелень одуванчика, эндивий, фенхель, пищевые дрожжи, семена тыквы, кунжут, фасоль, шпинат, семена подсолнечника, репа и грецкие орехи.
. . .
Валин
Помогает производству мышц, восстановлению, энергии, выносливости — уравновешивает уровень азота и используется при лечении связанных с алкоголем повреждений мозга.
Находит его: яблоки, миндаль, бананы, свекла, брокколи, морковь, сельдерей, зелень одуванчика, салат, пищевые дрожжи, окра, петрушку, пастернак, гранаты, картофель, кабачки, помидоры и репу.

Вам может потребоваться больше белка, если вы…
• Психически / физически устали (особенно если вам нужен дневной сон)
• Страдаете от травм / спазмов / мышечной болезненности
• Не можете сконцентрироваться или сосредоточиться
• Потеря мышечной массы или неспособность для его создания
• Выпадение волос
• Страдание от ломкости / ломкости ногтей
• Необычно восприимчивость к солнечным ожогам
• Страдает головными болями, обмороком, тошнотой
• Капризным, тревожным, капризным или подавленным

Помните, наши тела созданы и биологически запрограммированы на выживание.Симптомы — это то, как ваше тело пытается общаться с вами. Если ему не хватает того, что ему нужно для процветания, он сделает все возможное, чтобы получить то, что ему нужно, с тем, что у него есть. Если вы не можете нарастить / сохранить мышцы, это, вероятно, связано с тем, что вы не получаете достаточно белка, а ваше тело берет его оттуда, откуда может — из мышечной ткани. Если вы страдаете повторяющимися / множественными травмами, ваше тело, вероятно, не имеет белка, необходимого для силы, восстановления и восстановления. У вас хлипкие и ломкие ногти? Вы теряете слишком много волос? Ваше тело может удерживать тот белок, который он хранит в «банке», вместо того, чтобы использовать то немногое, которое у него есть, для создания новых ногтей или густых волос.

Вот почему идеальные цельные продукты, богатые питательными веществами, и почему истинное здоровье обеспечивается именно такими продуктами, а не такими ярлыками, как «веганский». Тот факт, что кто-то является веганом, вегетарианцем или всеядным человеком, не делает его здоровым. Многие люди совершают ошибку, «становятся веганами» и потребляют много обработанной, лишенной питательных веществ нездоровой пищи, пасты и т. Д. Истинное здоровье достигается за счет употребления разнообразных цельных продуктов — тех, которые придумала сама природа. Это так просто.

Хотите увидеть, насколько вкусными могут быть рецепты с сильным растительным действием?

А вот полезная таблица.
Эта таблица предназначена только для справки, так как рекомендуется думать о пище в ее «целостности» — в ее естественной, растительной основе. Отличное питание действительно связано с балансом и разнообразием. Например, для хорошего здоровья важно все, что входит в состав моркови, не только бета-каротин или витамин С, но и вся морковь. Он упакован так, как спроектировала мать-природа — симфония питательных веществ, клетчатки и большого набора защитных соединений, большинство из которых до сих пор остаются безымянными (и неоткрытыми).Представь это.

Нужно ли мне комбинировать источники белка при каждом приеме пищи, чтобы получать все незаменимые аминокислоты?
Нет. Это миф. Почти все цельные продукты (включая зелень и овощи) содержат белок, и почти все формы белка содержат все белок-образующие аминокислоты в определенном количестве. Если вы едите разнообразную цельную пищу, богатую питательными веществами, ваше тело будет творить чудеса, чтобы сохранить то, что ему нужно для оптимального функционирования. Ученые раньше утверждали, что у травоядных разовьется дефицит белка, если они не будут получать незаменимые аминокислоты в надлежащих комбинированных количествах с каждым приемом пищи.Но наши тела потрясающие. Видите ли, когда мы едим, аминокислотные «отложения» превращаются в «банк хранения», и затем организм берет то, что ему нужно, по мере необходимости. Таким образом, вам не нужно есть дополнительные белки вместе с каждым приемом пищи, чтобы получить полноценный белок. В вашем теле уже настроена система; вам просто нужно съесть разнообразную пищу, чтобы наполнить банку. Употребляя разнообразную растительную пищу с «неполным белком» в течение дня, мы легко можем получить достаточно «полноценного белка».

Представьте себе гигантскую гориллу весом 400 фунтов.Что он ест, чтобы вырастить свое сильное мускулистое тело? Листья, стебли, корни, семена и фрукты (и, возможно, случайные насекомые, которые питаются этими продуктами). Организм на самом деле меньше работает (использует меньше энергии) для переработки белка из растительной диеты, чем из-за мясной диеты. Это энергосбережение отлично подходит для более эффективного лечения, укрепления и общего оптимального здоровья. Большинство источников белка растительного происхождения, в отличие от источников животного происхождения, также оказывают ощелачивающее действие на организм. Это означает меньше болей и болей, свободу от болезней, лучший сон, более счастливое настроение, улучшенную память и концентрацию, более сильное / более эффективное пищеварение и общее улучшение состояния здоровья.

Полноценные источники растительного белка
Помните — разнообразие. А если вы хотите упростить себе задачу, вот несколько вкусных цельных продуктов с полноценными растительными белками, которые можно хранить в кладовой или холодильнике. Добавляйте их в салаты, смузи, обертывания и многое другое.

Также полезно есть один раз в день смузи на растительной основе, например, Vega One. Он содержит 15 граммов качественного растительного белка на порцию (введите SHIPUSVEGA при оформлении заказа, чтобы получить бесплатную доставку) — Я обычно ем один в день с двумя мерными ложками.

(они тоже без глютена)
Амарант: рецепты | как лопнуть
Спирулина и хлорелла : добавить в смузи, принять порошок или таблетки
Гречка: рецепты | как приготовить
Семя чиа: рецептов
Семя конопли: рецепт конопляного молока
Квиноа: советы и рецепты по приготовлению
Проросшая чечевица (проращивание делает их законченными):
как проращивать чечевицу | рецепты чечевицы

***
Распечатайте эту полезную таблицу белков растений и храните ее в бумажнике или сумочке.Используйте его как справочник при планировании обедов на неделю или при покупках.
***

Все дело в разнообразии.
В то время как вопрос о белках часто задают едоки, питающиеся растениями, не отбрасывайте его в необразованном тумане гордости за травоядных. Очень важно, чтобы мы получали достаточное количество белка каждый день, но, как видите, это не так сложно, как думает большинство людей, на самом деле это довольно просто (и мы упоминали о восхитительном?). Разнообразие — это ключ к получению всех незаменимых аминокислот, которые нам нужны, и YumUniverse делится бесконечной коллекцией чистых рецептов цельных продуктов, которые включают это разнообразие.Поистине вселенная возможностей. Получайте удовольствие от этого.

Вам понравился этот бесплатный ресурс? Затем, пожалуйста, поделитесь им с другими в Твиттере, нажав здесь.

— — —
Хотите попробовать рецепты плантастика?

Прием пищи влияет на развитие кишечной микробиоты здоровых австралийских детей в возрасте от одного до двух лет

Grasp55 — / — мыши демонстрируют нарушенное всасывание жира и устойчивость к ожирению, вызванному диетой с высоким содержанием жиров

Поколение

Для генерации мышей Grasp55 ^{— / —} , эмбриональные стволовые клетки, несущие мутацию Grasp55 (название аллеля 14Cg14 trasp2: Gorasp2) , штамм: C57BL / 6NTac, цвет шерсти: черный, закуплен в KOMP Repository, Окленд, Калифорния, США) культивировали и использовали для инъекции бластоцисты мышам-альбиносам для получения химерных мышей (Macrogen Inc., Сеул, Корея). Животных с высокой степенью химеризма окраски шерсти подвергали обратному скрещиванию с мышами C57BL / 6N (Orient Bio Inc., Сеул, Корея) на протяжении более шести поколений. Передачу по зародышевой линии наблюдали по пигменту шерсти и подтверждали генотипированием по SNP. Гетерозиготных мышей Grasp55 ^+/- использовали для получения гомозиготных мышей Grasp55 ^{— / —} . Праймеры для генотипирования следующие: GRASP55_WT (эндогенный) прямой: 5′-TCT CTG AGA GTG TGC TTG CTT AC-3 ‘, обратный: 5′-GGA TTT AGG AGT TTG GTT AGC TGA-3′, GRASP55_KO (неокассета) вперед: 5’-TCA TTC TCA GTA TTG TTT TGC C-3 ‘, назад: 5′-TCC AAA GAT GAA CCT CCC AG-3’.

Для создания трансгенных мышей pCAG-GRASP55-Myc из VectorBuilder (www. vectorbuilder.com). Способность этой конструкции обеспечивать экспрессию GRASP55 была протестирована с помощью временной трансфекции в клетки HEK293. Плазмиду расщепляли с помощью ApaLI и SspI для вырезания фрагмента размером 4 т.п.н., а затем микроинъектировали в пронуклеус оплодотворенных яиц.Инъецированные яйца имплантировали суррогатным матерям C57BL / 6N для получения потомства, и проводили генотипирование детенышей с помощью ПЦР для идентификации тех, кто несет трансген GRASP55-Myc (Macrogen Inc.). Экспрессия белка экзогенного GRASP55-Myc была примерно в восемь раз выше, чем эндогенного GRASP55 в тощей кишке мыши (фиг. 9h). Праймеры для генотипирования следующие: GRASP55 прямой: 5′-TCA CTC ACT GTG GAT GTG ACG-3 ‘, обратный: 5′-GGT TAC AAA TAA AGC AAT AGC ATC AC-3’.

Мышей разводили и содержали в соответствии с требованиями к исследованиям животных Медицинского центра Йонсей, и все процедуры были одобрены Комитетом по исследованиям на животных Медицинского центра Йонсей (номер протокола 2016-0106).Все эксперименты на животных проводились с использованием мышей-самцов и их соответствующих контрольных однопометников. Мыши имели свободный доступ к диете и воде при цикле 12 часов света / 12 часов темноты в условиях контролируемой температуры. Стандартная диета содержала 10 ккал% жира (D12450B, Research Diets, Нью-Брансуик, Нью-Джерси, США), а диета с высоким содержанием жиров содержала 60 ккал% жира (D12492, Research Diets).

Культура клеток, дифференцировка Caco-2, окрашивание LD, плазмиды, трансфекция и подавление генов

Клетки HEK293T и клетки HeLa (Американская коллекция типовых культур [ATCC], Манассас, штат Вирджиния, США; регулярно тестировались на микоплазмы) культивировались в среде DMEM (Thermo Fisher, Waltham, MA, USA) с добавлением 10% фетальной бычьей сыворотки (FBS) и пенициллина (50 МЕ мл ^-1 ) / стрептомицина (50 мкг мл ^-1 , все от Thermo Fisher ).Клетки Caco-2 (ATCC; регулярно тестируются на микоплазму) культивировали в среде DMEM (Thermo Fisher) с добавлением 20% FBS, пенициллина (50 МЕ мл ^-1 ) / стрептомицина (50 мкг мл ^-1 ), 2 мМ L-глутамина и заменимые аминокислоты (все от Thermo Fisher). Для дифференцировки клетки Caco-2 поддерживали в течение 3 недель в системе трансвелл со сменой среды каждые 2 дня. Образование плотного соединения было подтверждено путем измерения трансэпителиального электрического сопротивления. Для окрашивания LD комплекс 400 мкМ олеиновая кислота: бычий сывороточный альбумин (BSA) (конечное соотношение концентраций 4: 1 мМ; Merck-Millipore, Берлингтон, Массачусетс, США) наносили в апикальную камеру на 16 ч до сбора урожая.Плазмиды, кодирующие человеческие GRASP55-Myc, HA-Arf1 и Myc-Sar1, были описаны ранее ⁴⁶ . кДНК GRASP55-Myc была субклонирована в плазмиду pCMV-Myc. Мутантные плазмиды получали с помощью набора для сайт-направленного мутагенеза на основе ПЦР (Stratagene, La Jolla, CA, USA) в соответствии с протоколом производителя. Для создания стабильных линий клеток с нокдауном GRASP55, , сверхэкспрессией GRASP55, и гиперэкспрессией ATGL , клетки Caco-2 и HeLa трансдуцировали лентивирусными частицами, продуцируемыми из клеток HEK293T, которые были трансфицированы упаковывающей плазмидой psPAX2, pMD2.Плазмида оболочки G и плазмида pLKO.1 с короткой шпилькой РНК (shRNA) (контрольная shRNA: # SHC001, GRASP55, -специфическая shRNA: # TRCN0000129489; Yonsei Genome Center, Сеул, Корея) или клон Lenti ORF ( GRASP55 905 # RC202946L3, ATGL: # RC205708L3; Ориген, Роквилл, Мэриленд, США). Клетки, стабильно экспрессирующие shРНК или указанные гены, отбирали с использованием пуромицина.

Тесты иммуноблоттинга и иммунопреципитации

Антитела, использованные в этом исследовании, перечислены в дополнительной таблице 5.Для иммуноблоттинга клетки гомогенизировали в буфере для лизиса, содержащем 50 мМ Трис, pH 7,4, 1% (об. / Об.) NP40, 150 мМ NaCl, 1 мМ ЭДТА с добавлением смеси ингибиторов протеаз (Roche, Applied Science, Mannheim, Германия). Для тканей буфер для лизиса дополнительно содержал 100 мМ бензамидина и 0,3% трипсина I сои. Образцы белка разделяли электрофорезом в SDS-полиакриламидном геле. Разделенные белки переносили на нитроцеллюлозную мембрану при 250 мА постоянного тока в течение 1 ч 40 мин и подвергали блоттингу соответствующими первичными и вторичными антителами.Для иммуноблоттинга APOB плазмы отделяли 2 мкл образцов плазмы и переносили при 30 мА постоянного тока в течение 16 часов. Полосы белка детектировали по усиленной хемилюминесценции (ECL), а плотность полос измеряли с использованием программного обеспечения для визуализации (ImageJ, Национальные институты здравоохранения, США, https://imagej.net/Welcome). Для иммунопреципитации клеточные лизаты смешивали с антителами против Myc (конъюгат с сефарозными шариками, Cell Signaling), анти-GRASP55 или контрольными антителами IgG (Merck-Millipore) и инкубировали в течение ночи при 4 ° C в буфере для лизиса, содержащем 20 мМ Трис-HCl. (pH 7.9), 150 мМ NaCl, 1% (об. / Об.) Тритон X-100, 5 мМ Na ₂ EGTA, 5% глицерин и полная смесь ингибиторов протеаз (Roche Applied Science, Мангейм, Германия). Иммунные комплексы центрифугировали при 4 ° C, а затем четыре раза промывали буфером для лизиса перед элюированием буфером для образцов 2 × додецилсульфат (SDS) и проводили иммуноблоттинг. MG132 и олеиновые кислоты были приобретены у Merck-Millipore.

Выделение липидных капель и субклеточное фракционирование

Кишечный эпителий четырех мышей-самцов через 4 часа после перорального введения масляного болюса (оливковое масло, 10 мкл г ^-1 масса тела, Merck-Millipore) гомогенизировали с помощью гомогенизатора Даунса ( Merck-Millipore).Постнуклеарный супернатант (PNS) собирали после центрифугирования гомогенатов при 3000 × g в течение 10 мин и переносили в пробирку для центрифугирования для ротора SW41 (Beckman Coulter, Brea, CA, USA). Промывочный буфер (2 мл) загружали поверх PNS. Верхние фракции LD разделяли центрифугированием с использованием ультрацентрифуги Optima TLX (Beckman Coulter) с качающимся ковшовым ротором SW41 при 182000 × g в течение 1 часа. Для одновременного анализа белков в ЛД и других органеллах (рис.5а), оставшиеся фракции подвергали анализу субклеточного фракционирования, как описано ниже.

Субклеточное фракционирование с использованием среды OptiPrep Density Gradient Medium (Merck-Millipore) выполняли следующим образом. Ткань тощей кишки мыши промывали PBS, измельчали ​​на крошечные кусочки в среде для суспензии клеток, содержащей 0,85% (мас. / Об.) NaCl и 10 мМ трицин-NaOH (pH 7,4), и гомогенизировали повторным пропусканием через иглу шприца 30G. PNS собирали после центрифугирования гомогенатов при 1500 × g в течение 10 мин и загружали поверх раствора градиента плотности, содержащего 2.5–30,0% (мас. / Об.) OptiPrep в среде для суспензии клеток. Субклеточные органеллы разделяли центрифугированием с использованием ультрацентрифуги Optima TLX (Beckman Coulter) с качающимся ковшовым ротором SW41 при 200000 × g в течение 2,5 часов. Девять фракций собирали сверху вниз и 40 мкл каждой фракции использовали для иммуноблоттинга.

Иммуноцитохимический, иммуногистохимический и микроскопический анализ изображений

Относительно антител см. Дополнительную таблицу 5. Для иммуноцитохимического окрашивания клетки культивировали на 18-миллиметровых круглых покровных стеклах и фиксировали 10% формалином в течение 10 минут при комнатной температуре.Фиксированные клетки трижды промывали PBS, а затем пермеабилизировали PBS, содержащим 0,1% Triton X-100 (PBST), в течение 15 мин при комнатной температуре. Клетки инкубировали с блокирующим раствором, содержащим 5% ослиной сыворотки, 1% BSA и 0,1% желатина в PBS, в течение 30 мин при комнатной температуре. После блокирования клетки окрашивали путем инкубации с соответствующими первичными антителами в течение ночи при 4 ° C. После трехкратной промывки PBS клетки затем обрабатывали вторичными антителами, конъюгированными с флуорофором и красителем.Для окрашивания LD клетки также окрашивали BODIPY 493/503 (Merck-Millipore). Флуоресцентные изображения получали с помощью лазерного сканирующего конфокального микроскопа с масляной линзой с числовой апертурой (NA) × 63 1,4 (LSM 780, Carl Zeiss, Берлин, Германия).

Для иммуногистохимического анализа тканей кишечника тощую кишку выделяли, фиксировали в 10% нейтральном забуференном формалине (Merck-Millipore) и заключали в парафиновый блок. Парафиновые срезы тощей кишки были разрезаны, и определение антигена было выполнено путем термической обработки.Сайты неспецифического связывания блокировали 5% ослиной сывороткой, 1% BSA и 0,1% желатином в PBS в течение 30 мин. Указанные первичные антитела наносили на ночь при 4 ° C. Ткани обрабатывали вторичными антителами, конъюгированными с флуорофором и красителем. Флуоресцентные изображения получали с использованием лазерного сканирующего конфокального микроскопа с водным объективом с числовой апертурой × 40 1,4 (LSM 780, Carl Zeiss). Для окрашивания липидных компонентов парафиновое стекло тощей кишки окрашивали Oil Red O и гематоксилином Майера. Микроскопические изображения получали с помощью вертикального микроскопа BX53, оснащенного цифровой камерой DP73 (Olympus Co., Синдзюку, Токио, Япония).

Pull-down анализ

Антитела, использованные в этом исследовании, перечислены в дополнительной таблице 5. Все рекомбинантные слитые белки были продуцированы в штамме BL-21 (DE3) Escherichia coli . Синтез GST-слитых белков и слитых белков His ₆ индуцировали добавлением 0,5 мМ изопропил-β-D-1-тиогалактопиранозида при 37 ° C. Рекомбинантные белки впоследствии очищали с помощью гранул глутатион-сефарозы (GE Healthcare Bio-Science AB, Бьёркгатан, Упсала, Швеция) или с помощью системы очистки белков никель-нитрилотриуксусной кислоты (Ni-NTA) (QIAGEN, Hilden, Германия) в соответствии с инструкциями производителя. .Элюированные слитые белки His ₆ смешивали с 20 мкг слитых с GST рекомбинантных белков, связанных с глутатион-сефарозой. После инкубации в течение ночи при 4 ° C связанные с гранулами комплексы промывали, элюировали в буфере для образцов SDS и проводили иммуноблоттинг.

Просвечивающая электронная микроскопия

Тощая кишка и печень, выделенные у мышей, немедленно фиксировали в течение 12 часов 2% -ным глутаровым альдегидом-параформальдегидом в 0,1 М фосфате (pH 7,4) при 4 ° C. Образцы промывали в 0,1 М фосфатном буфере, затем фиксировали 1% OsO ₄ , дегидратировали в возрастающих концентрациях этанола и пропиленоксида и помещали в набор Poly / Bed 812 (Polysciences, Warrington, PA, USA).После заливки чистой свежей смолы и полимеризации при 65 ° C образцы помещали в печь электронного микроскопа (TD-700, DOSAKA, Япония) на 24 часа. Первоначально вырезали толстые срезы 200–250 нм и окрашивали толуидиновым синим (Merck-Millipore) для световой микроскопии. Ультратонкие срезы (~ 70 нм) получали с помощью ультрамикротома (UltraCut-UCT, Leica, Австрия), которые затем собирали на медных сетках 100 меш. После окрашивания 2% уранилацетатом (15 мин) и цитратом свинца (5 мин) тонкие срезы исследовали с помощью просвечивающей электронной микроскопии при 120 кВ (Tecnai G ₂ Spirit Twin, Thermo Fisher).Диаметр LD и цистерн Гольджи анализировали с использованием программного пакета ImageJ, как сообщалось ранее ²¹ . Обобщенные результаты диаметра LD (рис. 3f) и максимальной ширины просвета цистерн Гольджи (дополнительный рис. 6b) представлены с использованием гистограмм частотного распределения.

Анализы параметров плазмы мышей

WT и Grasp55 ^{— / —} мышей не кормили в течение 16 часов и кровь собирали сердечной пункцией. Образцы крови центрифугировали при 1000 × g в течение 10 мин при 4 ° C.После центрифугирования 10 мкл верхнего желтого слоя плазмы переносили в Dry Slide Reagents (Fujifilm Co., Акасака, Минато, Токио, Япония). Некоторые параметры плазмы, включая триглицериды, общий холестерин, альбумин, общий билирубин и общий белок (дополнительная таблица 3), измеряли с помощью автоматического клинического химического анализатора Fuji Dri-chem Nx500 (Fujifilm Co.) в соответствии с инструкциями производителя. Перед каждым измерением использовалась карта контроля качества (Fujifilm Co.) для корректировки вариабельности партии в каждом из реагентов для слайдов.

Анализ липопротеинов с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (FPLC)

Кровь у четырех мышей-самцов каждой группы собирали пункцией сердца через 2 часа после перорального применения масла. Образец (250 мкл) объединенной плазмы подвергали гель-фильтрации с FPLC для анализа липопротеинового профиля. GE Healthcare ÄKTAexplorer, оборудованный колонкой Superose 6 10/300 GL (GE Healthcare Bio-Science AB, Björkgatan, Uppsala, Швеция), использовали с 10 мМ фосфата натрия, 0,15 М хлорида натрия, 0.01% (мас. / Об.) Натрия EDTA и 0,02% (мас. / Об.) Азида натрия, pH 7,2 при комнатной температуре. Система FPLC работала с постоянным потоком 500 мкл мин ^-1 , и фракционирование собирали через 5 мин с 400 мкл на фракцию. Концентрации триглицеридов и общего холестерина во фракциях 1–30 определяли в соответствии с инструкциями производителя, используя реагент Infinity Triglycerides Reagent или Cholesterol Reagent от Thermo Fisher Scientific Inc. (Мидлтаун, Вирджиния, США).

Исследования in vivo на мышах

Метаболический анализ: жир и безжировую массу тела оценивали с помощью системы ¹ H TD-NMR minispec (LF90 II, Bruker Optik, Ettlingen, Германия) до и после 4 недель приема HFD.Энергетический баланс, включая потребление пищи и расход энергии, оценивался с помощью системы мониторинга метаболизма (CLAMS; Columbus Instruments, Колумбус, США) в течение 4 дней (2 дня акклиматизации с последующими 2 днями измерений) до и после 4 недель на HFD.

Тест на лептин и инсулин: для измерения уровней лептина в плазме мышей не кормили в течение 16 часов или давали свободный доступ к пище. Образцы крови собирали посредством сердечной пункции, и концентрации лептина определяли с использованием набора для иммуноанализа (Cayman Chemical Company, Ann Arbor, MI, USA).Для теста на толерантность к инсулину мышей не голодали в течение 4 часов. Затем образцы крови самцов мышей в возрасте 12 недель собирали через хвостовую вену до (базальная, время 0), а также после внутрибрюшинной инъекции инсулина (0,75 Ед. Кг ^-1 масса тела, Merck-Millipore) при 15, 30, 60, 90 и 120 мин. Концентрации глюкозы в плазме измеряли с помощью глюкометра (Accu-Chek, Roche Diagnostics Corp., IN, США).

Тест на толерантность к оральному жиру. Для теста на толерантность к оральному жиру мышам не давали голодать в течение 16 часов, а затем вводили 10 мкл г ^-1 оливкового масла массы тела через желудочный зонд.В некоторых экспериментах Triton WR-1339 (15% в физиологическом растворе, 0,5 г / кг ^-1 ; Merck-Millipore) вводили внутривенно в боковую хвостовую вену через 20 минут после введения через зонд оливкового масла для ингибирования катаболизма липопротеинов (рис. 4a). . Образцы крови (30 мкл) собирали через хвостовые вены до (базальный, время 0), а также через 1, 2, 3 и 4 ч после перорального введения масла. Затем образцы крови центрифугировали при 1000 × g в течение 10 минут при 4 ° C. После центрифугирования измеряли концентрацию триглицеридов и общего холестерина в образцах плазмы с использованием набора для колориметрического анализа TG (Cayman Chemical Company) и набора для количественного анализа холестерина (Abcam, Cambridge, UK), соответственно.

Поглощение аминокислот: WT и Grasp55 ^{— / —} Мышей не кормили в течение 16 часов, а затем давали 10 мкл / г раствора массы тела, содержащего аминокислоты, растворенные в PBS (pH 7,4) в конечной концентрации 10 в несколько раз выше, чем концентрация в плазме у животных WT при пероральном введении через желудочный зонд. В раствор добавляли 1,5 мкКи мл ^{-1 14} С-радиоактивно меченного глицина, L-пролина или L-триптофана (Моравек, Калифорния, Калифорния, США). Через 1 ч животных умерщвляли, собирали кровь путем пункции сердца и определяли уровень радиоактивности.

Анализ липидов кишечника на мышах: для измерения уровней триглицеридов и холестерина в кишечнике собирали тощую кишку мышей дикого типа и Grasp55 ^{— / —} мышей. Липиды экстрагировали методом экстракции Фольча ⁴³ . Липидный экстракт сушили в токе азота и добавляли 1% Triton X-100 в хлороформе. Липиды снова сушили в потоке газообразного азота, и образцы растворяли в 100 мкл H ₂ О. Концентрации триглицеридов, общего холестерина и сложного эфира холестерина измеряли с использованием набора для колориметрического анализа триглицеридов (Cayman) и набора для количественного анализа холестерина. (Абкам).

Анализ поглощения липидов in vitro: [1- ¹⁴ C] -радиомеченная олеиновая кислота (55 мКи ммоль ^-1 ) и немеченая олеиновая кислота были приобретены у Moravek и Merck-Millipore, соответственно. Радиоактивно меченые и немеченые олеиновые кислоты конъюгировали с BSA (Merck-Millipore) в бессывороточной среде DMEM путем добавления концентрированной жирной кислоты в этанольный раствор таким образом, чтобы количество этанола составляло <0,5% (об. / Об.). Молярное соотношение радиоактивно меченной олеиновой кислоты, немеченой олеиновой кислоты и БСА составляло 4 мкМ: 4 мМ: 1 мМ.Перед добавлением к клеткам Caco-2 среду инкубировали в течение 1 ч при 37 ° C. Монослои дифференцированных клеток Caco-2 дважды промывали бессывороточной средой DMEM перед добавлением 1 мл комплексов жирных кислот-БСА к апикальной поверхности клеток или 2 мл к базолатеральной стороне. В противоположную камеру наносили бессывороточную среду DMEM без BSA или жирной кислоты. После инкубации в течение 24 часов при 37 ° C апикальную и базолатеральную среды собирали и центрифугировали при 1000 × g в течение 5 минут для удаления клеточного дебриса. Радиоактивность в среде анализировали с использованием жидкостного сцинтилляционного анализатора Tri-Carb 2910TR (Perkin Elmer, Waltham, MA, USA) и нормировали на фоновую радиоактивность.

Количественная ПЦР в реальном времени (qRT-PCR). Кишечный эпителий мышей-самцов, голодавших в течение 16 часов, переносили в круглодонную пробирку без РНКазы и лизировали с использованием буфера для лизиса (Thermo Fisher) с 2-меркаптоэтанолом. После центрифугирования при 12000 × g в течение 2 минут при комнатной температуре супернатант переносили в чистую пробирку, не содержащую РНКаз, и гомогенизировали, пропуская 10 раз иглу 21-G, прикрепленную к шприцу без РНКазы. Супернатант переносили в новую пробирку без РНКазы после центрифугирования при 12000 × g в течение 2 минут при комнатной температуре.РНК очищали из лизатов с использованием набора PureLink RNA Mini Kit (Thermo Fisher). Очищенные образцы РНК подвергали обратной транскрипции с использованием Премиксов РНК в кДНК EcoDry (Takara Bio Inc., Киото, Япония). Общий реакционный объем доводили до 20 мкл водой, свободной от РНКазы, после смешивания со 100 нг кДНК, наборами праймеров, SYBR Premix Ex Taq (Takara Bio Inc.) и эталонным красителем ROX (Takara Bio Inc.). Амплификацию выполняли с помощью StepOne Plus (Applied Biosystems, Уолтем, Массачусетс, США) в следующих условиях цикла: 95 ° C в течение 30 с, затем 40 циклов при 95 ° C в течение 5 секунд и 60 ° C в течение 30 секунд.Анализы проводили в пяти независимых экспериментах для каждой кДНК. Относительные уровни экспрессии мРНК рассчитывали с использованием метода сравнительного порогового цикла (Ct) с GAPDH в качестве контроля, как показано ниже: ΔCt = Ct (GAPDH) — Ct (целевой ген). Кратность изменения экспрессии гена, нормированная на GAPDH, по сравнению с контрольным образцом, была рассчитана как 2 ^-ΔΔCt . Праймеры для qRT-PCR следующие: ATGL вперед: 5′-ACC AGC ATC CAG TTC AAC CT-3 ‘, обратный: 5′-ATC CCT GCT TGC ACA TCT CT-3’, MGL вперед: 5 ′ -GGT CAA TGC AGA CGG ACA GT-3 ′, обратный: 5′-ATG GAG TGG CCC AGG AGG AA-3 ′, GAPDH вперед: 5′-CAT CAC TGC CAC CCA GAA GAC TG-3 ′, обратный : 5′-ATG CCA GTG AGC TTC CCG TTC AG-3 ′.

Исследования на мухах

Мухи: мух содержали на корме для мух быстрого приготовления, приобретенном в Каролине (Берлингтон, Северная Каролина, # 173200), при 25 ° C и влажности 60% с циклом 12 часов / 12 часов свет / темнота. Штаммы мутантных мух bmm ¹ и UAS-bmm: EGFP были предоставлены доктором Рональдом П. Кюнляйном ¹⁷ . NP1 — GAL4 (также известный как Myo1A — GAL4 , DGRC112001) был получен из Kyoto Stock Center. dGrasp ³⁰² (BL65258), UAS — dGrasp — GFP (BL8507), UAS — mCD8 :: mR275 UAS, mR278- UAS, и mR278- Штаммы RNAi (BL34082) были получены из Bloomington Stock Center.Все мутантные линии и трансгенные линии были скрещены в течение пяти поколений с контрольным генотипом w ¹¹¹⁸ . Для ясности строка w ¹¹¹⁸ во всей рукописи называется контрольной.

Окрашивание кишечника мух: для препарирования использовались самки в возрасте от 7 до 14 дней. Кишки, от передней кишки до прямой кишки / ануса, отделяли от мух в 1 × PBS. Изолированные кишки фиксировали 4% параформальдегидом в растворе 0.1% Triton X-100 PBS (PBST) в течение 30 минут и трижды промывали в 1 × PBS по 15 минут каждый. Фиксированные образцы инкубировали в течение 30 минут с раствором Nile Red (N3013, Sigma-Aldrich, 1 мг / мл ^-1 в ацетоне) для окрашивания липидов и раствором TO-PRO-3 (T3605, Invitrogen, 1 мМ мл ^-1. в ДМСО) для окрашивания ядер, каждое в разведении 1: 1000 в 0,1% PBST. Образцы промывали трижды в 1 × PBS по 15 мин каждый, а затем помещали на предметное стекло с монтажной средой Vectashield (H-1000 Vector Laboratories).Для мечения энтероцитов у мух NP1> mCD8 :: RFP фиксированные кишки инкубировали с блокирующим раствором, содержащим 5% нормальной козьей сыворотки в 0,1% PBST. Затем образцы инкубировали с кроличьими антителами DsRed (1: 200, 632496, Clontech) в PBST в течение ночи при 4 ° C, а затем с антикроличьими антителами Alexa 568 (1: 400, A11011, Molecular Probes) в течение 1 часа при комнатной температуре. температура после трех стирок с PBST. Для окрашивания липидов у этих мух образцы инкубировали с раствором BODIPY (D3922, Thermo Fisher Scientific, 1 мг / мл ^-1 ) при разведении 1: 1000 в 0.1% PBST в течение 30 минут и дважды промывали PBST. Окрашенные кишки устанавливали и визуализировали с помощью конфокального микроскопа LSM 700 Zeiss (Йена, Германия).

Измерение TG: Набор для колориметрического анализа триглицеридов (10010303, Cayman Chemical) и набор для анализа белков BCA (23227, Thermo Fisher Scientific) использовали для измерения уровней триглицеридов и количественного определения белков соответственно. Головы пяти самок мух удаляли, а остальные тела помещали в пробирки объемом 1,5 мл, содержащие 100 мкл разбавленного реагента для анализа на замену NP40 (поставляется с набором).Образцы гомогенизировали пестиком, инкубировали при 70 ° C в течение 5 минут, а затем центрифугировали в течение 10 минут при 4 ° C. Для количественного определения содержания ТГ 10 мкл каждого образца переносили в 96-луночный планшет и в каждую лунку добавляли 150 мкл разбавленного раствора смеси ферментов (поставляется с набором). Затем планшет инкубировали в течение 15 минут при комнатной температуре, и оптическую плотность образца измеряли при длине волны 540 нм. Чтобы нормализовать уровни липидов, уровни белка измеряли из 10 мкл супернатанта из каждого образца с использованием набора для анализа BCA, как показано ниже.Раствор BCA был приготовлен путем смешивания раствора A и раствора B в соотношении 50: 1. Из каждого образца 10 мкл супернатанта смешивали с 200 мкл раствора BCA, помещали в 96-луночный планшет и инкубировали при 37 ° C в течение 30 мин. Затем измеряли оптическую плотность при длине волны 562 нм для определения уровней белка. Наконец, нормализованный уровень липидов для каждого генотипа мух рассчитывали путем деления значения OD при 540 нм на значение OD при 562 нм.

Статистический анализ

Все эксперименты проводили не менее трех раз независимо для каждого условия.Результаты нескольких экспериментов представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего. Статистический анализ проводили с использованием тестов Стьюдента t или дисперсионного анализа (ANOVA) с последующими множественными сравнительными тестами Тьюки, если это необходимо; p <0,05 считалось статистически значимым. Расчеты проводили с использованием GraphPad Prism5 (GraphPad Software, Inc., Ла-Хойя, Калифорния, США).

Сводка отчетов

Дополнительная информация о дизайне исследований доступна в Сводке отчетов по исследованиям природы, связанной с этой статьей.

Взаимосвязь между соблюдением средиземноморской диеты и качеством жизни, связанным со здоровьем, и удовлетворенностью жизнью среди пожилых людей